关于液相色谱仪的日常使用注意事项0排气阀

关于液相色谱仪的日常使用注意事项

关于液相色谱仪的日常使用注意事项 2011年12月04日 来源： 我们杭州赛尔泰科技有限公司产品技术原自美国Syltech公司并依托着浙江大学雄厚的科研力量和人才优势，开发而成的高效液相色谱仪产品，我们目前国内生产基地在杭州滨江，拥有syltech 500高效液相色谱仪、VERTEX STI 5000等度系统产品. 我们公司希望能给广大色谱从业人员在使用及维护液相色谱仪时提供一些浅薄的帮助，希望大家支持我们公司扶持我们产品。 下面我们来分享下多年来的实践操作经验,关于液相色谱仪在日常使用时应该注意的事项。

用液相色谱进行分析时，即使装置无故障，有时也会无法做出准确的分析。分析前作好检查工作，可防患于未然。为此，将平时须留意的事项，做简要介绍。一、启动前的检查1流动相的置备要与装置相适应流动相必须经过过滤：在送液泵内，为了防止杂质和颗粒进入流路，要装有0.45μm的吸滤器，否则会导致流路和污染，使仪器工作不正常。1)流动相恢复到室温后使用：流动相温度与室温相差时，容易产生气泡。导致仪器基线很难稳定，特别是发生漂移，使流动相要恢复到室温后再使用。2)流动相务必进行脱气：使用液相色谱仪时遇到的最大麻烦就是流动相产生气泡，这会引起泵输液不畅和检测器产生噪声和漂移。3)检查溶剂瓶内吸滤器是否堵塞：溶剂的质量或微生物的生长会堵塞吸滤器，从而影响液相色谱系统的正常运行。有效防止吸滤器堵塞的有效方法：a.若需使用含盐的流动相，使用前务必过滤；b.流动相若为蒸馏水或含盐的缓冲液，建议现用现配；c.尽量避免溶剂瓶在阳光下暴晒。吸滤器堵塞后的处理方法：a.取下吸滤器滤头放在(1:4,V/V)硝酸溶液烧杯中超声清洗15min；b.取出后用蒸馏水超声清洗10min；c.用吸耳球吹出过滤头中的液体；d.再换蒸馏水超声清洗10min；e.用吸耳球吹出过滤头中的水分；将吸滤器滤头重新放入熔剂瓶中(正相系统注意将吸滤器滤头烘干在使用)。4)更换流动相时应注意事项：a)更换有互溶性的流动相时：a.将吸滤器部分放入准备更换流动相的烧杯中边振动边清洗，更换烧杯中的流动相直至清洗干净；b.打开排液阀，按清洗键清洗泵中的流动相；c.然后将吸滤器部分再放入流动相瓶内，关闭排液阀，在较短时间内清洗流路；d.最后连接柱和检测器，清洗整个分析流路。b)更换无互溶性的流动相时：准备与新旧流动相具有互溶性的中间清洗液，首先换成中间清洗液，然后再把中间清洗液换成新的流动相.每次更换顺序都要遵循前诉的a～d的顺序。c)更换缓冲液的流动相时：在新旧流动相的任一方或双方使用缓冲液时，准备蒸馏水做中间清洗液，首先用蒸馏水置换整个流路，然后更换成新的流动相，这是防止缓冲液中的盐析出。2输液泵1)如果进液管内不进液时，使用注射器吸液：发现进液管内不进液或有大气泡时，打开排液阀，用用注射器从排液管中吸液。若空气量太大时，有时用泵的清洗功能也无法彻底清除空气。2)通常在输液前进行流动相的清洗：例如，停机夜间的温度与白天相差大时，或几天未开机时，有时在泵头内会产生气泡。如果不清除就输液时，会由于气泡不能脱出造成输液不畅，因此，需进行5分钟清洗，排除气泡。3六通阀1)样品溶液进样前必须用0.45μm滤膜过滤，以减少微粒对进样阀的磨损。2)转动阀芯时不能太慢，更不能停留在中间位置，否则流动相受阻，使泵内压力剧增，甚至超过泵的最大压力，再转到进样位时，过高的压力将使柱头损坏。3)为防止缓冲盐和样品残留在进样阀中，每次分析结束后应冲洗进样阀。通常可用水冲洗，或先用能溶解样品的溶剂冲洗，再用水冲洗。4自动进样器1)确认清洗液：自动进样器的清洗液，请使用与流动相同的液体。但是含盐分时必须把盐分清除。另外，清洗液在6通阀内与流动相接通，这时须注意盐分不要析出（盐的析出是造成堵塞的原因）。2)清洗液脱气：自动进样器的清洗液，也是封入在样品计量部分的溶剂。在连续运转时会产生气泡导致误差，必须使用脱气装置进行脱气。3)必须净化清洗液：例如，停机夜间的室温与白天相差较大时，或几天未开机时，清洗液的流路中会产生气泡，不除去气泡就进行分析时，进样量会产生偏差，因此在等待基线稳定的期间内，进行清洗，排出气泡。用吸液器从排液器彻底吸引（起动注水）后，关闭排液，进行清洗。二、启动后（等待稳定后时）的检验1.漏液的噪声和基线漂移：　　确认在分析条件下装置启动后，液体流动的部分，液体流过的部分全部不流液。如有漏夜，要把漏夜处系紧或更换零件。2.泵的压力的检查：输液泵的压力必需稳定，才能取得良好的分析结果。根据需要的压力和流动相种类的不同有所差异，但变动的幅度大致在0.5MPa以内范围，为正常。在压力变动大再清洗一次看看,如还是不行,则应考虑单向阀内部是否污染。试按下述操作进行：1)关闭排液阀，取下进液管的过滤器，从这里用吸液器将流动相强行压入。（脏物粘着单向阀的内部上时有效）2)按使用说明书中所列的异丙醇进行清洗。3)试更换单向阀。（应有备用件）3.基线噪声和基线漂移的检查在检查基线噪声和基线漂移时，最好选择没有进样时的空白运行基线。常见的几种现象和处理方法：1)基线噪声异常大时：可认为是检测池中进入气泡未脱出的原因。气泡脱出不净时，可能是检测池被污染。按使用说明书所述的检测池清洗方法进行，检查灯的亮度，低时更换灯泡。2)出现基线漂移和不规则波动时：分段检查色谱柱、流路配管、进样器、检测池、泵及流动相等可能受到污染。必须进行彻底清洗。3)产生规则的（周期性的）波动时：可考虑空气调节器的风直吹在检测器上，或由于空调设备性能造成室温变化所致等。三、分析结束后的工作1．色谱柱的清洗：在一段时间内不进行分析时，建议清洗柱子，并从装置上卸下，种类不同的柱子，清洗的方法也不同，必须按柱的使用说明书确认。存放时，柱内应充满溶剂（甲醇或乙腈），两端要封死。柱子要轻拿轻放。2．装置的清洗：使用缓冲液时，分析完了后必须用水洗净。一段时间内不使用时，柱清洗后将柱卸下，与柱连接的出入管道，用联接器进行短路连接，清洗流路。为防止流路内部发霉或产生细菌，建议用异丙醇、甲醇等醇清洗流路后进行封存。洗净后进液过滤器和检测器出口管道浸泡在装有清洗液的容器中，已防干燥。

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